Профессор Маурицио Чеккарелли и Колл.
Процесс старения затрагивает все ткани и характеризуется, как правило, уменьшением физиологических объемов лица. Это приводит к птозу — характерному стареющей коже. В эстетической медицине, до последнего времени, эти несовершенства компенсировали путём введения филлеров, которые уравновешивают потерянный объем. Сегодня мы можем регенерировать физиологическим путем все ткани лица, возвращая ему не только естественные молодые объемы, но и восстанавливая биологические функции новообразованных тканей.
Протокол Full Face Regeneration включает, в первую очередь дифференциацию стволовых клеток находящихся в состоянии покоя, физиологически присутствующих во всех наших тканях, и их последующую метаболическую и пролиферативную стимуляцию для улучшения биологического состояния тканей. Это приводит к формированию молдых, метаболически активных клеток, которые восстанавливают объёмы лица. Как только природные физиологические объёмы достигнуты, ткань, посредством механотрансдукции (ограничивает риск гиперплазии) прекращает регенерацию. В зависимости от различных типов тканей и среднего срока продолжительности жизни новых сформированных клеток, процедура, как только достигается физиологический объем, повторяется с различным промежутком времени.
Активация мезенхемальных клеток
В научной литературе говорится, что стволовые клетки присутствуют во всех тканях. Эти клетки имеют функцию регенерации тканей, подвергшимся небольшому повреждению. С другой стороны, сильный клеточный ущерб определяет репаративный процесс (рубцевание) объема потерянных клеток посредством апоптоза или некроза.
Кроме того, существует большое количество стволовых клеток, непрерывно циркулирующих в крови. Поврежденные ткани организма посылают сигнал этим клеткам, которые устремляются (диапедез) к поражённым зонам для регенерации. Сигналом и стимулом для дифференциации мезенхимальных клеток является воспалительный процесс.
Мезенхемальные стволовые клетки находятся в фазе «покоя» во всех тканях организма: кожа, жир, мускулы, кости.
Кожа обладает стволовыми клетками как на уровне базального слоя эпидермиса, так и на уровне дермы. В жировой ткани существует очень высокая концентрация стволовых клеток (1 на каждый 50 адипоцитов ), необходимых для поддержания жировых клеток, способных хранить энергию в форме триглицеридов. В мышечной ткани имеются клетки, между мышечными волокнами и эндомизием, оболочкой соединительной ткани, которая их покрывает, называемые «спутниковые». Это стволовые клетки, которые при наличии необходимости могут быть дифференцированы в новые мышечные клетки. Костная ткань имеет надкостницу, фибро-эластичную соединительную мембрану, которая прилипает к внешней поверхности костей и содержит стволовые клетки. Надкосница имеет два слоя: наружный слой, богатый кровяными сосудами и с малым количеством клеток, а также внутренний, более богатый эпителиоидными клетками имеющими остеогенные свойства (Остеогенный слой Ollier, регенерация костей). В случае поражений костных клеток, мезенхемальные клетки приобретают остеоформирующий потенциал и дифференциируються в костную ткань.
Стимуляция дифференциации спящих стволовых клеток обусловлена воспалительным процессом с последующим высвобождением некоторого количества ROS (свободных радикалов кислорода). Это подтверждается научной литературой.
Все исследования подтверждают, что ROS являются внутриклеточными медиаторами, которые регулируют функции клеток. В небольших количествах они индуцируют дифференциацию мезенхемальных стволовых клеток, в то время как в большом количестве они активируют апоптоз.
Из научных заявлений, в ноябре 2015 года, в Центре экспериментальной дерматологии Университета госпиталя Рамон-и-Каджал в Мадриде была создана процедура по регенерации кожи, используя лечение фотодинамической терапией с низкой дозой ALA. Применяя низкую концентрацию ALA (аминолевулиновой кислоты) и стимулируя с помощью красного света при 630 нм. происходит высвобождение небольшого количества ROS, что приводит не к апоптозу или некрозу, но к дифференциренциации мезенхемальных стволовых клеток.
В научной литературе говорится, что низкая концентрация ROS (0,1-0,5 ммоль) приводит к дифференциации стволовых клеток, а более высокие концентрации (выше 1,0 ммоль) ведут к апоптозу. Исходя из этого, высвобождение ROS в концентрации выше 1,0 ммоль индуцирует гибель клеток апоптозом, тогда как более низкие концентрации от 0,1 до 0,5 ммоль стимулируют дифференциацию стволовых клеток в новые функциональные клетки.
Было трудно рассчитать правильное количество ROS, эффективное для дифференциации стволовых клеток, не провоцируя апоптоз, с применением ALA и красного света при 630 нм. Поэтому мы искали возможность, которая позволила бы нам правильно, стехиометрически, расчитать необходимое количество ROS.
В 2009 году мы начали использовать свободный ROS в концентрации 5 ммоль для индукции апоптоза адипоцитов. Таким образом, этот раствор, если разбавленный, мог активировать мезенхемальные стволовые клетки.
Аскорбиновая кислота в присутствии ионов трехвалентного железа, активирует реакцию Фентона с высвобождением ROS. На основе описанной химической реакции можно вычислить, стехиометрически, количество ROS, выделяемого определенным количеством аскорбиновой кислоты. Для активации апоптоза используется концентрация 5 ммоль аскорбиновой кислоты в растворе трехвалентного железа, разведение этого раствора, даёт нужную концентрацию вещества для активации стволовых клеток. Разбавляя 60 мг на литр аскорбиновой кислоты, мы получаем концентрацию ROS 0,34 ммоль, оптимальную для активации дифференциации стволовых клеток.
Инъекция препарата, позволяет активировать дифференциацию стволовых клеток всех тканей, которые мы хотим регенерировать. Процесс дифференциации клеток завершается в течение 21 дня. Таким образом, мы получаем молодые и функциональные клетки, восстанавливающие молодость тканей лица.
По прошествии 21-го дня, мы стимулируем пролиферацию и метаболическую активность новообразованных клеток, используя факторы роста тромбоцитов. Использование этой техники позволяет нам получить реальное омоложение.
Таким образом, текущий протокол кожной регенерации предусматривает, во-первых, активацию дифференциации мезенхемальных стволовых клеток, а затем пролиферативную и метаболическую стимуляцию новообразованных клеток.
Регенерация тканей лица
Процедура, как только физиологические объёмы были достигнуты, повторяется в зависимости от среднего срока продолжительности жизни клеток, которые составляют различные ткани.
Учитывая средний срок жизни фибробласта (2 месяца), и время разрушения ретикулярного коллагена ( 6-8месяцев), для оптимального результата, процедура должна повторяться каждые шесть месяцев. Раствор аскорбиновой кислоты и трехвалентного железа, способный продуцировать 0,34 ммоль ROS, необходимо ввести папульно интрадермально в интересующие участки. Через 21 день, после дифференциации стволовых клеток в новые фибробласты, вводится PDGF для стимуляции их пролиферации и метаболической активности вновь образованных клеток. Процедура повторяется 2 раза в год.
Для регенерации жировой ткани, учитывая средний срок жизни адипоцита (6-9 лет), после достижения физиологического объема, процедура повторяется примерно через шесть лет. Раствор аскорбиновой кислоты и трехвалентного железа, способный продуцировать 0,34 ммоль ROS, необходимо ввести папульно подкожно в интересующие участки. Через 21 день, после дифференциации стволовых клеток в новые адипоциты, мы дополнительно стимулируем рост адипоцитов липооееным раствором. Этот раствор состоит из глюкозы и инсулина, и стимулирует гипертрофию адипоцитов, что ведёт к пролиферации и дифференциации стволовых клеток, и в следствии к новой гиперплазии. Процедура повторяется 3-4 раза в год.
Для регенерации мышечной ткани,( средний срок жизни миоцита составляет 10-15 лет), процедуру, как только необходимый объем достигнут, необходимо повторять через каждые 10 лет. Раствор аскорбиновой кислоты и трехвалентного железа, способный продуцировать 0,34 ммоль ROS, необходимо ввести иглой папульно внутримышечно в интересующих зонах. Через 21 день, после дифференциации стволовых клеток в новые миоциты, вводится PDGF для стимуляции пролиферации и метаболической активности новообразованных клеток. Через тридцать дней, используя инъекции раствора аминокислот с разветвленными боковыми цепями (ВСАА) и холина, мы тонизируем и стимулируем синтез белка в мышцах. ВСАА стимулируют синтез белка, активируя сигнал mTORC1, необходимый для анаболизма мышц. Другим потенциальным преимуществом BCAA, является улучшение анаболического гормонального фона, улучшающего рост мышц. Холин, как предшественник ацетилхолина, увеличивает концентрацию этого нейромедиатора улучшая мышечный тонус, и стимулирует синтез оксида азота, улучшая кровоснабжение мышечной ткани.
Холин и BCAA необходимо вводить внутримышечно, раз в неделю на протяжении месяца (4 раза в месяц). Для поддержания оптимального результата, повторять один раз в месяц.
Для костной ткани , учитывая средний срок жизни остеобласта (3 месяца), процедуру необходимо повторять каждые три-шесть месяцев, пока не будет достигнут желаемый объем. Раствор аскорбиновой кислоты и трехвалентного железа, способный продуцировать 0,34 ммоль ROS, ввести иглой папульно доходя до надкостницы, в областях нуждающихся в регенерации. Через 21 день, после дифференциации стволовых клеток в новые остеобласты, используя PDGF смешанный с трикальцийфосфатом (сферические гранулы диаметром 30-40 микрон) стимулируем пролиферацию и метаболическую активность вновь образованных клеток и формирование фиброзного коллагена. Процедура повторяется каждые 3 месяца до получения желаемого результата.
Заключение
Протокол FULL FACE REGENERATION , позволяет полностью омолодить все ткани лица, возвращая естественные молодые объёмы и оптимизируя их биологическое состояние.
Библиография
1. Abhishek Sohni and Catherine M. Verfaillie Mesenchymal Stem Cells Migration Homing and Tracking Stem Cells International Volume 2013 (2013), Article ID 130763, 8 pages
2. Ae-Ri Ji,1,* Seung-Yup Ku,1,2,* Myung Soo Cho,3 Yoon Young Kim,2 Yong Jin Kim,1 Sun Kyung Oh,2 Seok Hyun Kim,1,2 Shin Yong Moon,1,2 and Young Min Choicorresponding author1,2 Reactive oxygen species enhance differentiation of human embryonic stem cells into mesendodermal lineage Exp Mol Med. 2010 Mar 31; 42(3): 175–186.
3. Barbara Gunnella, Maurizio Ceccarelli Attivazione cellule staminali quiescenti The Physiologica Medical Letter Vol.XI September 2016 N°2
4. Carr A1, Frei B. Does vitamin C act as a pro-oxidant under physiological conditions? FASEB J. 1999 Jun;13(9):1007-24.
5. Dr. Scott P. Bruder David J. Fink Arnold I. Caplan, Mesenchymal stem cells in bone development, bone repair, and skeletal regenaration therapy, Journal of Cellular Biochemistry Volume 56, Issue 3
6. Elisa Carrasco, María I. Calvo, Alfonso Blázquez-Castro, Daniela Vecchio, Alicia Zamarrón, Irma Joyce Dias de Almeida, Juan C. Stockert, Michael R. Hamblin, Ángeles Juarranz, and Jesús Espada1, Photoactivation of ROS production in situ transiently activates cell proliferation in mouse skin and in the hair follicle stem cell niche promoting hair growth and wound healing J Invest Dermatol. 2015 Nov; 135(11): 2611– 2622.
7. Francesco Saverio Tedesco, Arianna Dellavalle, Jordi Diaz-Manera, Graziella Messina and Giulio Cossu, Repairing skeletal muscle: regenerative potential of skeletal muscle stem cells, J Clin Invest. Volume 120, Issue 1 2010;120(1):11–19.
8. García Giménez J. Víctor — González Nicolás Alban J. Antonio Tratamiento del envejecimiento cutaneo mediante bioestimulación con factores de crecimiento autógenos International Journal Of Cosmetic Medicine And Surgery Volume 7 — numero 2 – 2005
9. John Tower Stress and stem cells Wiley Interdiscip Rev Dev Biol. 2012 Nov-Dec; 1(6): 10.1002/
10. Maurizio Ceccarelli J. Víctor García Full Face Regeneration: theoretical and practical protocol, The Physiologica Medical Letter Vol.2 May 2010 N°1
11. Maurizio Ceccarelli Trattamento delle adiposità localizzate per apoptosi degli adipociti The Physiological Medical Letter Vol.V Dicember 2011 N°4
12. Maurizio Ceccarelli, J.Victor Garcia Gimenez, J.Antonio Gonzales-Nicolas Albandea, STBA y STBA-FILL: tratamiento del envejecimiento cutaneo a partir de las proteinas plasmaticas, Cosmetic Surgery Times, Octubre 2012, Vol.3 N° 5
13. Mishra PJ, Banerjee D. Activation and differentiation of mesenchymal stem cells. Methods Mol Biol. 2011;717:245-53.
14. Tullia Maraldi, Cristina Angeloni, Elisa Giannoni and Christian Sell Reactive Oxygen Species in Stem Cells Oxid Med Cell Longev. 2015; 2015: 159080.
15. Valerie Horsley, Antonios O. Aliprantis, Lisa Polak, Laurie H. Glimcher and Elaine Fuchs NFATc1 balances quiescence and proliferation of skin stem cells Cell. 2008 Jan 25; 132(2): 299–310.
16. Zhuqing Qu-Petersen, Bridget Deasy, Ron Jankowski, Makato Ikezawa, James Cummins, Ryan Pruchnic, John Mytinger, Baohong Cao, Charley Gates, Anton Wernig, Johnny Huard, Identification of a novel population of muscle stem cells in mice, JCB Home » 2002 Archive » 28 May » 157 (5): 851